270198 UE+PR Experiments on cyanobacterial bioenergetics (2007S)

Die folgenden apparativen Aspekte werden in dem Praktikum behandelt: Photoautotrophe Kultivierung verschiedener Stämme axenischer Cyanobakterien (einschl. Zubereitung und Sterilisierung der Nährlösung, Inokulierung, Betreuung und Ernte); Polarographische Messung des Sauerstoffumsatzes bei ganzen Zellen in Photosynthese und Atmung; Aufnahme von Arrheniusdiagrammen; Aufschließen der Zellen mittels French-Pressure-Cell-Extrusion; Auftrennung und Isolierung von Plasma- und Thylakoid-Membranen durch isopyknische Zentrifugation; Messung respiratorischer Elektronentransportreaktionen (Cytochromoxidase und Cytochromreduktase) in den isolierten Membranvesikeln mittels Zweiwellenlängenspektralphotometrie; Erstellung von Dixon-Plots; Immunoblotting ausgewählter Membranproteine; Radiorespirometrie mittels 14-C-markierter Substrate zur Diagnose biochemischer Abbauwege; Lumineszenzphotometreische Messung der Energycharge (EC) von Cyanobakterien unter verschiedenen energetischen Regimen; Quantitative Messungen zur pflanzlichen Photosynthese (Lichtsättigung; Aktionsspektrum; Emerson-Enhancement).
Zulassungsvoraussetzungen: Grundkenntnisse in Physikalischer Chemie (v.a. Spektroskopie und Polarographie) und in Biochemie (Stoffwechselphysiologie)
Durchführung: Blocklehrveranstaltung
Lernbehelfe: Ausführliche Skripten und Gebrauchsanweisungen werden individuell verteilt. Zur theoretischen Ergänzung dient auch das gleichzeitig abgehaltene Bioenergetische Seminar
Beurteilung (IP): erfolgt aufgrund des abzugebenden Protokolls über die Versuchsdurchführung